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用途：分離植物組織細胞核
更新時間：2025-05-13
細胞核是一個功能單位，完整的保存了遺傳物質(zhì)，并指導(dǎo)RNA的合成。RNA是蛋白質(zhì)及其他細胞組分合成所必須的。在大多數(shù)細胞類型中，由于核被膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的連續(xù)性以及細胞核表面與細胞骨架之間的連接等原因，細胞核是被固定于細胞中的。流式細胞術(shù)是一種快速、準確、高效的測定和分析細胞DNA含量的方法，近年來已廣泛應(yīng)用于植物研究中，如細胞周期分析、植物倍性鑒定、染色體分揀、細胞核DNA含量測定、生殖途徑鑒定、DNA變異分析、遺傳穩(wěn)定性分析和體胚發(fā)生分析等。只通過物理方法即切碎葉片往往不能獲取大量完整的細胞核，還需要加入一些特定成分的緩沖液，使植物細胞破損，分散細胞器，進而解離出細胞核，為后續(xù)的核DNA提取和DNA含量分析做準備。流式細胞術(shù)測定的生物細胞必須處于單細胞懸液狀態(tài)，制備優(yōu)質(zhì)的細胞核懸液的關(guān)鍵在于選擇合適的細胞核分離緩沖液。不同植物的組織結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分存在較大差異，使用細胞核分離緩沖液的效果不同，而且目前沒有一種普遍適用的細胞核分離緩沖液，因此需要嘗試不同的緩沖液，甚至改進其成分，以獲得的細胞核分離效果。
細胞核分離緩沖液(Nuclear Separation Buffer，NSB)又稱細胞核隔離緩沖液(Nuclear Isolation Buffer，NIB)，也稱解離緩沖液(Dissociation Buffer)，可以將細胞核跟細胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細胞骨架等胞內(nèi)成分分離開來。目前常用的解離液有Galbraith、Tris-MgCl2、HEPES、WPB、LB01、mGb、Marie、GPB、OTTO和Marie等，各種解離液成分和濃度各不相同，不同的植物樣品需要選擇相適應(yīng)的解離液，Marie解離液主要由吐溫、葡萄糖、、氯化鈉、EDTA、檸檬酸鈉、HEPES、巰基乙醇等組,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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