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用途：分離植物組織細(xì)胞核
更新時(shí)間：2025-05-13
細(xì)胞核是一個(gè)功能單位，完整的保存了遺傳物質(zhì)，并指導(dǎo)RNA的合成。RNA是蛋白質(zhì)及其他細(xì)胞組分合成所必須的。在大多數(shù)細(xì)胞類型中，由于核被膜與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的連續(xù)性以及細(xì)胞核表面與細(xì)胞骨架之間的連接等原因，細(xì)胞核是被固定于細(xì)胞中的。流式細(xì)胞術(shù)是一種快速、準(zhǔn)確、高效的測(cè)定和分析細(xì)胞DNA含量的方法，近年來已廣泛應(yīng)用于植物研究中，如細(xì)胞周期分析、植物倍性鑒定、染色體分揀、細(xì)胞核DNA含量測(cè)定、生殖途徑鑒定、DNA變異分析、遺傳穩(wěn)定性分析和體胚發(fā)生分析等。只通過物理方法即切碎葉片往往不能獲取大量完整的細(xì)胞核，還需要加入一些特定成分的緩沖液，使植物細(xì)胞破損，分散細(xì)胞器，進(jìn)而解離出細(xì)胞核，為后續(xù)的核DNA提取和DNA含量分析做準(zhǔn)備。流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定的生物細(xì)胞必須處于單細(xì)胞懸液狀態(tài)，制備優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞核懸液的關(guān)鍵在于選擇合適的細(xì)胞核分離緩沖液。不同植物的組織結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分存在較大差異，使用細(xì)胞核分離緩沖液的效果不同，而且目前沒有一種普遍適用的細(xì)胞核分離緩沖液，因此需要嘗試不同的緩沖液，甚至改進(jìn)其成分，以獲得的細(xì)胞核分離效果。
細(xì)胞核分離緩沖液(Nuclear Separation Buffer，NSB)又稱細(xì)胞核隔離緩沖液(Nuclear Isolation Buffer，NIB)，也稱解離緩沖液(Dissociation Buffer)，可以將細(xì)胞核跟細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞骨架等胞內(nèi)成分分離開來。目前常用的解離液有Galbraith、Tris-MgCl2、HEPES、WPB、LB01、mGb、Marie、GPB、OTTO和Marie等，各種解離液成分和濃度各不相同，不同的植物樣品需要選擇相適應(yīng)的解離液，OTTO解離液(Ⅰ和Ⅱ)主要由檸檬酸、吐溫、等組成。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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