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用途：分離植物組織細胞核
更新時間：2025-05-13
細胞核是一個功能單位，完整的保存了遺傳物質，并指導RNA的合成。RNA是蛋白質及其他細胞組分合成所必須的。在大多數細胞類型中，由于核被膜與內質網的連續性以及細胞核表面與細胞骨架之間的連接等原因，細胞核是被固定于細胞中的。流式細胞術是一種快速、準確、高效的測定和分析細胞DNA含量的方法，近年來已廣泛應用于植物研究中，如細胞周期分析、植物倍性鑒定、染色體分揀、細胞核DNA含量測定、生殖途徑鑒定、DNA變異分析、遺傳穩定性分析和體胚發生分析等。只通過物理方法即切碎葉片往往不能獲取大量完整的細胞核，還需要加入一些特定成分的緩沖液，使植物細胞破損，分散細胞器，進而解離出細胞核，為后續的核DNA提取和DNA含量分析做準備。流式細胞術測定的生物細胞必須處于單細胞懸液狀態，制備優質的細胞核懸液的關鍵在于選擇合適的細胞核分離緩沖液。不同植物的組織結構和化學成分存在較大差異，使用細胞核分離緩沖液的效果不同，而且目前沒有一種普遍適用的細胞核分離緩沖液，因此需要嘗試不同的緩沖液，甚至改進其成分，以獲得的細胞核分離效果。
細胞核分離緩沖液(Nuclear Separation Buffer，NSB)又稱細胞核隔離緩沖液(Nuclear Isolation Buffer，NIB)，也稱解離緩沖液(Dissociation Buffer)，可以將細胞核跟細胞膜、內質網、細胞骨架等胞內成分分離開來。目前常用的解離液有Galbraith、Tris-MgCl2、HEPES、WPB、LB01、mGb、Marie、GPB、OTTO和Marie等，各種解離液成分和濃度各不相同，不同的植物樣品需要選擇相適應的解離液，WPB解離液主要由Tris、氯化鎂、EDTA、氯化鈉、焦亞硫酸鈉、PVP、曲拉通等組成。該試劑僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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