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用途：流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等。
更新時(shí)間：2025-05-10
碘化丙啶染色(PI Stain)可以對(duì)細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡進(jìn)行分析，碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對(duì)中并與之結(jié)合的熒光染料，無(wú)堿基特異性。碘化丙啶與雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比，細(xì)胞內(nèi)的DNA被Propidium Iodide染色后，可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的分析，碘化丙啶染色后，假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1～2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過(guò)程中丟失，因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強(qiáng)度小于1，在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞凋亡時(shí)流式細(xì)胞檢測(cè)可呈現(xiàn)亞二倍體核型的特征，根據(jù)光散射的特點(diǎn)，PI染色可以區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的細(xì)胞峰型。細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)凋亡細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的前向光散射低于正常；在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低，對(duì)側(cè)向光散射的能力增加或沒(méi)有變化；在細(xì)胞凋亡的晚期前向和側(cè)向光散射的信號(hào)均降低；細(xì)胞壞死時(shí)細(xì)胞多表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹，因此前向光散射高于正常，對(duì)側(cè)向光散射高于正常。
Leagene碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)主要由PI、破膜劑等組成，經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)，亦可用于區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死，其工作濃度多為20～50μg/ml，不含RNase，推薦用于RNA染色，細(xì)胞檢測(cè)含量范圍一般為0.1～1×106之間。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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