大鼠Elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬生長(zhǎng)激素(GH)水平。用純化的豬生長(zhǎng)激素(GH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入生長(zhǎng)激素(GH)，再與HRP標(biāo)記的生長(zhǎng)激素(GH)抗體結(jié)合，大鼠Elisa試劑盒形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長(zhǎng)激素(GH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬生長(zhǎng)激素(GH)濃度。
大鼠Elisa試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，大鼠Elisa試劑盒然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。豬ELISA試劑盒小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
現(xiàn)在市場(chǎng)上的大鼠Elisa試劑盒質(zhì)量參差不齊，各類生物公司扎堆，如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要，具體我們總結(jié)有以下幾點(diǎn)可供參考：
一、特異性，大鼠Elisa試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對(duì)有關(guān)，若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)必須為單抗，建議使用雙單抗。
二、靈敏度，靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的大鼠Elisa試劑盒。
三、重復(fù)性，科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般大鼠Elisa試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
四、簡(jiǎn)便性，試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短，操作越便利，越容易受到用戶歡迎！這也不妨作為選擇試劑盒的一個(gè)指標(biāo)。
五、經(jīng)濟(jì)性，進(jìn)口分裝試劑盒因?yàn)槭∪ゲ簧傥锪骱蛨?bào)關(guān)費(fèi)用，與國(guó)外*試劑相比價(jià)格上有比較大的優(yōu)惠，大鼠Elisa試劑盒而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格，特別是48T等小包裝，目前很多客戶因?yàn)閷?duì)品牌的信任度問題，主要還是選擇國(guó)外*，但是國(guó)內(nèi)進(jìn)口分裝比較成熟的公司仍然是一個(gè)非常好的選擇！
大鼠Elisa試劑盒訂單下了，收到貨到運(yùn)用這段時(shí)間，也是要好好保存的，要特別注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過氧化物的活性，因此，大鼠Elisa試劑盒在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色，樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，大鼠Elisa試劑盒一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾，血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，大鼠Elisa試劑盒如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下，冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意，不要進(jìn)行劇烈振蕩，反復(fù)顛倒混勻即可，大鼠Elisa試劑盒在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
在線客服
電話咨詢
